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IP / Pull down Beads標簽抗體分子互作試劑盒基因表達產品內參抗體分子互作單品
CircRNA pull-down試劑盒
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 CircRNA pull down試劑盒(動物)

 FI8710-12T

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CircRNA pull-down試劑盒簡介


駿生物自主研發(fā)的 circRNA pull-down 試劑盒(已獲得國家知識產權局發(fā)明專利授權),利用“F2標簽”與其特異性配體的強親和力,高效調取細胞中的目標cirRNA及其結合蛋白。F2標簽是一段短的RNA序列,與目標circRNA連接后,幾乎不影響其結構和功能。

實驗前先將F2標簽序列與目標circRNA序列連接,構建成F2-circRNA過表達載體,轉染并裂解目的細胞,之后采用特異性配體磁珠來調取F2-circRNA及其結合蛋白。去除未結合的蛋白后,可以采用多種方法洗脫蛋白質。分離的蛋白產物既可以用Western blot檢測已知蛋白,也可以用質譜(LC-MS/MS)鑒定未知蛋白。




CircRNA Pull down試劑盒應用


蛋白-蛋白間的相互作用是蛋白質發(fā)揮生物學功能的主要模式,蛋白質會通過結合不同的伙伴來行駛不同的功能,形成復雜的信號轉導網絡。以下列舉了可應用pull down試劑盒的幾個研究方向或研究領域:

1. 確定2個蛋白是否具有直接相互作用;

2. 確定蛋白之間結合的結構域;

3. 病毒、細菌等病原體侵染宿主細胞的機制;

4. 酶和底物的作用機制;

5. 蛋白調控復合體的研究。



CircRNA pull-down試劑盒組分


 試劑名稱 體積12 Tests 體積24 Tests 保存條件
 磁珠 500 μL 1 mL 4 ℃
 裂解緩沖液 7 mL 14 mL 4 ℃
 NT2緩沖液 32 mL64 mL 4 ℃
 RNA結構緩沖液 650 μL1.3 mL 4 ℃
 漂洗液 32 mL 64 mL 4 ℃
 洗脫緩沖液 650 μL1.3 mL -20 ℃
 蛋白酶抑制劑 230 μL 460 μL -20 ℃
RNase抑制劑65 μL130μL -20 ℃
F2配體 250 μL 500 μL -20 ℃





CircRNA Pull down試劑盒優(yōu)勢


1、調取效率高:F2標簽序列與F2配體磁珠具有很強親和力,能夠高效調取F2-circRNA及其結合蛋白

2、不受circRNA接口處序列限制,適用于各種序列的circRNA;

3、F2標簽很短,只有16nt,幾乎不影響目標RNA的結構或功能;

4、洗脫液適配后續(xù)Western Blot質譜(LC-MS/MS)實驗。

5、操作簡便,耗時短,適用于初學者。


輝駿生物circrna pulldown試劑盒-調取效率高-適用范圍廣-操作簡便.png




CircRNA-pulldown試劑盒使用流程簡述


1. 構建F2-circRNA表達載體,轉染目標細胞并進行表達檢測;

2. 裂解樣本,同時制備F2配體磁珠;

3. 將細胞裂解液加入F2配體磁珠中,4 ℃孵育2~4 h;

4. 漂洗、洗脫得到目標蛋白及其互作蛋白復合物。





CircRNA pulldown試劑盒使用案例


circrna pulldown WB輝駿生物.jpg

circrna pulldown WB結果圖(陽性)


GST pull down實驗服務費用價格實惠質量高-輝駿生物

circrna pull-down MS:質譜檢索表格(部分展示)




circrna pull down試劑盒—客戶文章


1. A positive feedback between PDIA3P1 and OCT4 promotes the cancer stem cell properties of esophageal squamous cell carcinoma. Cell Communication and Signaling. 2024. IF=8.4.

2. Fumarate induces LncRNA-MIR44352HG to regulate glutamine metabolism remodeling and promote the development of FHdeficient renal cell carcinoma. Cell Death and Disease. 2024. IF=9.2.





circRNA pull down試劑盒(動物)說明書




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